Was ist die Hochleistungsflüssigkeitschromatographie (HPLC)?
29.08.2025
Was ist die Hochleistungsflüssigkeitschromatographie (HPLC)?
Die Hochleistungsflüssigkeitschromatographie (HPLC) ist eine analytische Technik, die verwendet wird, um Komponenten in einem Gemisch zu trennen, zu identifizieren und zu quantifizieren. Sie funktioniert, indem eine Flüssigkeitsprobe durch eine mit einer stationären Phase gefüllte Säule geleitet wird, während eine Hochdruckpumpe das Lösungsmittel (mobile Phase) antreibt. Verschiedene Verbindungen interagieren mit der stationären Phase unterschiedlich stark, was dazu führt, dass sie die Säule zu unterschiedlichen Zeiten verlassen – ein Prinzip, das als Retentionszeit bekannt ist.
Wie wird HPLC in der Forschung eingesetzt?
HPLC wird in verschiedenen wissenschaftlichen Bereichen breit eingesetzt. In der Peptid- und Pharmaforschung wird sie häufig verwendet, um:
Die Reinheit synthetisierter Verbindungen zu überprüfen.
Peptidfragmente oder -analoga zu trennen.
Kleine Konzentrationen von Verunreinigungen zu erkennen.
Proben für weitere strukturelle oder biologische Tests vorzubereiten.
(Referenz: Kazakevich & LoBrutto, 2007)
Hauptmerkmale von HPLC
Forscher schätzen HPLC, weil sie:
Hohe Auflösung – Die Fähigkeit, eng verwandte Verbindungen präzise zu trennen.
Quantitative Genauigkeit – Bietet zuverlässige Konzentrationsdaten für Analyten in komplexen Mischungen.
Vielseitigkeit – Kann Peptide, Proteine, Metaboliten und kleine organische Moleküle analysieren.
Skalierbarkeit – Methoden können von der Analyse auf Mikrogramm-Ebene bis zur preparativen Reinigung angepasst werden.
(Referenz: Swartz & Krull, 2012)
Was Forscher beobachtet haben
Studien, die HPLC verwenden, haben konsequent ihre Nützlichkeit bei der Qualitätskontrolle und Charakterisierung von Peptiden berichtet. Zum Beispiel verwendet die Peptidforschung häufig die umgekehrte Phase HPLC, um eine Reinheit von über 98–99% zu bestätigen, während analytische Durchläufe es Wissenschaftlern ermöglichen, sogar Spuren von Verunreinigungen zu erkennen. Neben Peptiden wurde HPLC angewendet, um metabolische Zwischenprodukte zu verfolgen, die Stabilität von Arzneimitteln zu bewerten und die Effizienz der chemischen Synthese zu überwachen.
Literaturverzeichnis
Dong, M.W. (2013). Moderne HPLC für praktische Wissenschaftler. Springer.
Kazakevich, Y.V., & LoBrutto, R. (2007). HPLC für Pharmazeutische Wissenschaftler. Academic Press.
Swartz, M.E., & Krull, I.S. (2012). Handbuch der analytischen Techniken in der HPLC. Wiley.
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